ПЦР-анализ: что это такое, когда он назначается и как проводится?

Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) — один из самых новых и точных способов диагностики[1]. За его разработку ученый Кэри Муллис получил в 1993 году Нобелевскую премию[2]. Высокотехнологичный лабораторный метод диагностики дает возможность выявлять множество заболеваний на самых ранних стадиях. Как проводится ПЦР-диагностика, когда назначают исследование с помощью этого метода и как подготовиться к анализу. Ответы на эти и другие вопросы — в статье.

ПЦР-диагностика: суть подхода

Метод ПЦР использует принципы молекулярной биологии. Его суть заключается в применении особых ферментов, которые многократно копируют фрагменты РНК и ДНК возбудителей болезни, находящихся в пробах биоматериала, например в крови.

После этого работники лаборатории сверяют полученные фрагменты с базой данных, выявляют тип возбудителя болезни и его концентрацию.

ПЦР проводят в амплификаторе — приборе, охлаждающем и нагревающем пробирки с пробами биоматериала. Нагрев и охлаждение необходимы для проведения репликации. Точность температурного режима влияет на точность результата.

Сферы применения метода

Для чего же нужен ПЦР? Диагностические возможности метода ПЦР огромны, с его помощью можно выявить самые разные инфекции.

Чаще всего ПЦР-метод применяют для диагностики[3,4]:

  • ВИЧ;
  • герпеса;
  • различных половых инфекций, в частности хламидиоза, уреаплазмоза, гарднереллеза, микоплазмоза и трихомониаза;
  • кандидоза;
  • гепатитов;
  • мононуклеоза;
  • листериоза;
  • цитомегаловируса;
  • туберкулеза;
  • вируса папилломы человека;
  • клещевого энцефалита.

Это далеко не полный список, метод ПЦР-анализа используется в разных областях медицины. В условиях нынешней сложной эпидемиологической обстановки ПЦР-метод используют для диагностики вирусных заболеваний, в том числе коронавирусной инфекции COVID-19[5].

Кстати

Метод ПЦР применяется не только в медицинских целях. В наши дни он используется и в иных сферах, например в криминалистике — в тех случаях, когда требуется определить, кому принадлежит найденный на месте преступления биоматериал[6]. ПЦР иногда используется также при установлении отцовства[7].

Преимущества и недостатки подхода

Какие плюсы у диагностики методом ПЦР?

Высокая чувствительность. Метод позволяет выявить возбудителя болезни даже при наличии нескольких молекул его ДНК, то есть на очень ранних стадиях, при хронической форме заболевания, а также в случаях, когда болезнь никак себя не проявляет, протекает латентно.

Универсальность. Для проведения ПЦР-анализа подходит почти любой биоматериал — от крови и слюны до клеток кожи.

Широкий охват. Исследование одного образца может выявить сразу нескольких возбудителей болезни.

Оперативность. Результат, как правило, готов через пять–семь часов, то есть получить заключение можно уже на следующий день после забора биоматериала.

Точность. Метод ПЦР практически не дает ложноположительных или ложноотрицательных результатов, если была соблюдена технология проведения этого анализа[8].

Преимущества метода ПЦР.jpg

Однако следует понимать, что совершенных методов анализа не бывает. У ПЦР есть и минус — высокие требования к соблюдению технологии и к профессионализму лаборантов. Если образец был загрязнен, анализ может дать ложный результат. Поэтому проводить ПЦР-диагностику лучше только в проверенных лабораториях, где внедрены системы контроля качества работы.

Исследуемый биоматериал

Для ПЦР-диагностики заболеваний на анализ берут разные виды биоматериала[9]. Выбор зависит от типа инфекции. При анализе на ЗППП методом ПЦР берут соскоб или мазок из шейки матки или уретры, а также мочу. Для выявления герпеса, цитомегаловируса, гепатита, токсоплазмоза и ВИЧ на анализ берут кровь. При анализе на мононуклеоз и цитомегаловирус берут мазок из зева. Спинномозговая жидкость используется для анализа при поражениях нервной системы. Для диагностики внутриутробных инфекций исследуются ткани плаценты. Для выявления легочных инфекций — мокрота или плевральная жидкость.

Подготовка к исследованию

Подготовка к ПЦР-диагностике напрямую зависит от типа биоматериала[10]. Кровь сдается натощак утром. Мочу также следует собрать утром в стерильный контейнер и сдать в лабораторию в ближайшие два часа. Перед взятием мазка или соскоба из урогенитальной области нельзя вступать в половые контакты за несколько дней до исследования, не следует проводить спринцевания. Мазок или соскоб нельзя сдавать во время менструации. Пациент, принимающий какие-либо лекарственные препараты или БАД, должен сообщить об этом врачу: возможно придется остановить курс приема, так как действующие вещества средства могут исказить результаты лабораторного анализа.

Подготовка к исследованию методом ПЦР.jpg

Методы ПЦР-диагностики заболеваний

Существует немало различных методик ПЦР-диагностики: ПЦР в реальном времени, секвенирование, пиросеквенирование, микрофлюидные технологии. Сейчас наиболее распространенным способом проведения анализа является ПЦР в реальном времени — этот метод практически не допускает ложноположительных результатов, к тому же срок обработки образцов при исследовании таким способом сокращается — результат можно получить уже через час.

Как расшифровать результаты ПЦР-исследования

Для пациента результат ПЦР-анализа может быть либо положительным, либо отрицательным[11]. Отрицательный означает, что следов враждебной ДНК не обнаружено и человек здоров. Положительный подразумевает наличие фрагментов ДНК возбудителя болезни — это значит, что человек заражен и ему требуется лечение.

Нередко ПЦР-диагностика дает положительный результат, но пациент не чувствует никакого недомогания, а признаки болезни отсутствуют. Значит, заболевание находится на очень ранней стадии развития. В этом случае необходимы дополнительные исследования и лечение. Если заболевание было диагностировано на столь раннем этапе, следует начинать терапию как можно скорее, ведь чем дальше зайдет болезнь, тем сложнее будет ее вылечить.


ПЦР-диагностика инфекций невероятно точна: она позволяет обнаружить возбудителя болезни, даже если в пробе находится всего одна-единственная молекула его ДНК[12]. Именно это качество сделало ПЦР-анализ одним из эффективнейших диагностических инструментов как для определения наличия инфекции, так и для контроля за ходом лечения.

Где можно проходить ПЦР-диагностику на выявление инфекций?

Проходить исследование, которое проводится методом ПЦР, можно в различных лабораториях. Однако нужно учитывать, что это достаточно специфический способ диагностики: высокая точность результата возможна исключительно при соблюдении всех требуемых условий. А потому для исследования важно обращаться в проверенные лаборатории с многоступенчатым контролем качества диагностики.

К таким относится и Лаборатория «Гемотест». Она оснащена передовой аппаратурой, соответствующей международным стандартам качества. Здесь работает высококвалифицированный медперсонал — врачи и лаборанты, имеющие большой опыт в проведении узкоспециализированных исследований.

В «Гемотест» проводятся ПЦР-анализы любой сложности. Для этого используются автоматизированные тест-системы ведущих зарубежных производителей. Контроль качества диагностических процессов начинается с момента взятия биологического материала и продолжается на всех последующих этапах: хранения образца, транспортировки и непосредственно анализирования. Такой алгоритм позволяет исключить вероятность ошибок и погрешностей в результатах диагностики.

«Ассортимент» услуг Лаборатории включает свыше 2500 видов анализов, в том числе общеклинические, микробиологические, молекулярно-генетические и гистологические. В «Гемотест» проводятся исследования методом ПЦР для диагностики заболеваний различных сфер:

  • урология, гинекология: определение ДНК хламидии трахоматис (Chlamydia trachomatis), ДНК гонококка (Neiseria gonorrhoeae), ДНК уреаплазм (Ureaplasma spp.), ДНК гарднереллы вагиналис (Gadnerella vaginalis) в отделяемом слизистых оболочек женских половых органов, в секрете простаты и так далее;
  • пульмонология: определение ДНК менингококка (Neisseria meningitidis), ДНК пневмококка (Streptococcus pneumoniae), ДНК гемофильной палочки (Haemophilus influenzae), ДНК микобактерии туберкулеза (Mycobacterium tuberculosis complex) в крови;
  • гастроэнтерология: определение ДНК хеликобактер пилори (Helicobacter pylori) в образцах фекалий;
  • терапия инфекционных заболеваний: определение ДНК вируса гепатита B (Hepatitis B virus) в крови, ДНК микроорганизмов рода сальмонелла (Salmonella spp.) в образцах фекалий;
  • гематология: определение ДНК цитомегаловируса (Cytomegalovirus) в моче.

Данные анализы можно сдавать в рамках различных комплексов, которые были разработаны врачами клинико-лабораторной диагностики «Гемотест» специально для оценки работы определенных органов и систем.

P. S. В «Гемотест» постоянно проводятся акции. Узнать о действующих специальных предложениям можно на сайте Лаборатории.

* Лицензия на осуществление медицинской деятельности № ЛО-50-01-011414 выдана 1 ноября 2019 года Министерством здравоохранения Московской области.

** Лицензия на осуществление медицинской деятельности № ЛО-23-01-014424 выдана 13 марта 2020 года Министерством здравоохранения Краснодарского края.


Вся информация, касающаяся здоровья и медицины, представлена исключительно в ознакомительных целях и не является поводом для самодиагностики или самолечения.